氨基酸分析柱作為一種高效液相色譜柱,主要用于氨基酸的分離與檢測(cè)。它的工作原理基于分離層析法,通過柱芯與氨基酸之間的化學(xué)反應(yīng)來實(shí)現(xiàn)對(duì)氨基酸的分離。柱芯的表面結(jié)構(gòu)對(duì)于分離效果至關(guān)重要,常見的表面結(jié)構(gòu)包括無機(jī)酸活性表面、有機(jī)酸活性表面和電子受體表面。
氨基酸分析柱其主要功能和應(yīng)用:
1、分離氨基酸:利用陽離子交換樹脂填充的分析柱可以有效分離混合氨基酸。氨基酸混合物在流動(dòng)相(緩沖溶液)的推動(dòng)下流經(jīng)色譜柱時(shí),不同氨基酸與樹脂中的交換基團(tuán)發(fā)生離子交換,從而實(shí)現(xiàn)分離。
2、定性定量分析:分離出的單個(gè)氨基酸組分會(huì)與茚三酮試劑發(fā)生反應(yīng),生成紫色或黃色化合物,然后通過吸光度檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)。這些有色產(chǎn)物的吸收強(qiáng)度與各氨基酸濃度成正比,符合朗伯-比爾定律,從而可以進(jìn)行氨基酸的定性和定量分析。
3、應(yīng)用于多種領(lǐng)域:全自動(dòng)氨基酸分析儀主要應(yīng)用于各種物質(zhì)中18種氨基酸的定性定量分析,例如在飼料行業(yè)中,測(cè)定原料和產(chǎn)品中的氨基酸含量,以保證質(zhì)量。
4、系統(tǒng)多樣性:氨基酸分析柱通常分為蛋白水解分析系統(tǒng)(鈉鹽系統(tǒng))和游離氨基酸分析系統(tǒng)(鋰鹽系統(tǒng)),兩者使用的洗脫液和pH值不同,因此可以分析的氨基酸種類和數(shù)量也不同。鈉鹽系統(tǒng)適合快速分析約25種氨基酸,而鋰鹽系統(tǒng)則可以分析多達(dá)約50種氨基酸,但速度較慢。