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液相色譜柱柱壓升高,是液相色譜分析中常見的問題。這會(huì)導(dǎo)致分析結(jié)果不準(zhǔn)確,甚至無法得到有效的分析結(jié)果。造成液相色譜柱柱壓升高的原因有很多,下面就具體介紹一下。
首先,柱篩板堵塞是造成柱壓升高的常見原因之一。通常情況下,堵塞是由于流動(dòng)相未經(jīng)過濾或?yàn)V膜孔徑過大或?yàn)V片損壞而引起的。這時(shí),可以采用反沖的方法去除堵塞物,以恢復(fù)正常的系統(tǒng)壓力。此外,排氣閥過濾芯、在線過濾器和保護(hù)柱的堵塞也會(huì)導(dǎo)致柱壓升高,此時(shí)應(yīng)更換濾芯或清洗。
其次,非特異性吸附也是一種常見的造成柱壓升高的原因。當(dāng)部分組分在柱子上有較強(qiáng)的非特異性吸附時(shí),且當(dāng)前所用的流動(dòng)相難以將它們洗脫時(shí),強(qiáng)保留組分的累積則會(huì)造成阻力增大和壓力升高。此時(shí),我們可以使用適當(dāng)?shù)娜軇_洗以除去吸附物質(zhì)。
此外,樣品的沉淀和鹽晶體的析出也可能導(dǎo)致柱壓升高。當(dāng)樣品所用的溶劑與流動(dòng)相不一致時(shí),樣品進(jìn)入柱中時(shí)有可能因溶解度降低而沉淀出來,造成壓力升高。在使用較高濃度的緩沖液或添加有緩沖液的流動(dòng)相后,如果沖洗不徹·底,緩沖液中的無機(jī)鹽成分可能會(huì)殘留在體系之中。它們會(huì)因在新流動(dòng)相體系中溶解度降低而析出,造成流動(dòng)相阻力加大,壓力升高。此時(shí),我們應(yīng)該使用對(duì)樣品有較高溶解度的溶劑沖洗,或者使用混溶的溶劑(如異丙醇)徹·底沖洗。
總之,液相色譜柱柱壓升高的原因有很多,需要我們?cè)趯?shí)驗(yàn)過程中注意檢查和排除。只有保證柱的良好狀態(tài)和流動(dòng)相系統(tǒng)的正常運(yùn)行,才能得到準(zhǔn)確可靠的分析結(jié)果。
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