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任何HPLC系統(tǒng)的一個(gè)重要部分是檢測(cè)器。HPLC檢測(cè)器設(shè)計(jì)用于識(shí)別和定量流動(dòng)相通過(guò)系統(tǒng)攜帶樣品的各個(gè)組分。
HPLC系統(tǒng)中可以使用多種檢測(cè)器,決定使用哪一種檢測(cè)器取決于樣品及其單個(gè)化合物的性質(zhì),或者取決于流動(dòng)相和樣品在通過(guò)HPLC系統(tǒng)時(shí)成分變化時(shí)的體積特性。
任何HPLC檢測(cè)器都應(yīng)具備某些功能。其中包括:
對(duì)混合物中化合物存在特異性或一般反應(yīng)
靈敏度和響應(yīng)面向溶質(zhì),而不是流動(dòng)相
低細(xì)胞體積,可最大限度地減少分析物條帶的分散
對(duì)溶質(zhì)濃度的線(xiàn)性響應(yīng)
溫度和流速的變化不應(yīng)影響檢測(cè)器響應(yīng)
以下是特定的HPLC檢測(cè)器:
質(zhì)譜檢測(cè)器 – 這種類(lèi)型的檢測(cè)器提供高靈敏度和選擇性。分析物首先在離子源中電離,然后在檢測(cè)之前根據(jù)其質(zhì)量/電荷比分離這些離子。
紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì) HPLC 檢測(cè)器 – 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì) HPLC 檢測(cè)器的類(lèi)型包括固定波長(zhǎng)、可變波長(zhǎng)和二極管陣列。它們專(zhuān)門(mén)用于吸收光的化合物。
光電二極管陣列 (PDA) HPLC 檢測(cè)器 – 使用多個(gè)二極管可以同時(shí)監(jiān)測(cè)不同波長(zhǎng)的多種吸收化合物。
熒光HPLC檢測(cè)器 – 這是最·靈敏和特異的。類(lèi)型包括單波長(zhǎng)、多波長(zhǎng)和激光誘導(dǎo)探測(cè)器。這種類(lèi)型依賴(lài)于化合物自然熒光或衍生化,將熒光標(biāo)簽添加到目標(biāo)分析物中,從而進(jìn)行檢測(cè)。
以下是體積特性HPLC檢測(cè)器:
電導(dǎo)率HPLC檢測(cè)器–這些檢測(cè)器的工作原理是使用由流通池組成的傳感器測(cè)量流動(dòng)相電導(dǎo)率,流通池包含兩個(gè)由鉑、鋼或貴金屬制成的電極。
折射率HPLC檢測(cè)器 – 檢測(cè)依賴(lài)于流動(dòng)相折射率的變化,因?yàn)榇嬖谙疵摶衔?RI檢測(cè)器的靈敏度最·低,但通常被認(rèn)為是通用檢測(cè)器。
電化學(xué)HPLC檢測(cè)器–包括平衡和動(dòng)態(tài)檢測(cè)器,它們對(duì)流動(dòng)相的組成或流速的變化敏感,對(duì)可還原或可氧化的物質(zhì)敏感。
光散射HPLC檢測(cè)器 – 有兩種類(lèi)型,包括低角度激光光散射和多角度激光散射檢測(cè)器。它們測(cè)量散射光,這是檢測(cè)高分子量分子的理想選擇,因?yàn)橄疵撘和ㄟ^(guò)基于分子大小的傳感器池。
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