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當(dāng)您結(jié)束一天的工作并關(guān)閉儀器時,您可能會問自己:“將色譜柱儲存在適當(dāng)?shù)牧鲃酉鄺l件下真的有必要嗎?它可能會在測試結(jié)束時增加一個額外的步驟,或者直到您回家后才忘記的事情,但簡短的回答是肯定的,色譜柱存儲確實很重要。
就像選擇合適的流動相用于特定色譜柱相可以優(yōu)化色譜柱的使用壽命一樣,在測試后適當(dāng)儲存色譜柱的流動相也可以延長色譜柱的使用壽命。在下面的示例中,您可以看到相同的方法和分析物對相同類型色譜柱的不同批次進行分析。
圖1.第一列色譜圖
圖2.第二列色譜圖
圖3.第三列色譜圖
分析物 | 第1列(圖1) | 第2列(圖2) | 第3列(圖3) |
Methionine | 1.05 | 1.02 | 0.91 |
Homocysteine | 1.17 | 1.14 | 1.03 |
Homocysteine-D3 | 1.16 | 1.13 | 1.02 |
Cysteine | 1.60 | 1.59 | 1.4 |
圖1是在適當(dāng)?shù)臈l件下存儲的較新色譜柱。后兩個是以前在整個實驗室中發(fā)現(xiàn)的較舊的色譜柱。雖然圖1和圖2中的色譜圖顯示保留時間相似,但根據(jù)峰形,該色譜柱可能在錯誤的條件下儲存。查看圖1和圖3時,不僅峰形大不相同,而且保留率也發(fā)生了變化。這清楚地表明該色譜柱未在推薦條件下存儲。所有三根色譜柱的保留時間見表1。
如果您在實驗室中找到一根舊色譜柱并將其扔到儀器上以測試相同色譜柱類型不同批次的保留時間,您可能會在舊色譜柱上看到截然不同的保留時間。這可能是因為該色譜柱在很多很多月前被扔進抽屜之前沒有正確存放。但是,如果儲存得當(dāng),色譜柱可以使用很長時間。
如果您要將色譜柱存放較長時間,大多數(shù)制造商建議使用適當(dāng)?shù)牧鲃酉鄡Υ嫔V柱,但最好在每天測試結(jié)束時使用。應(yīng)沖洗色譜柱以去除任何緩沖、酸性或堿性成分。為此,用與最近使用的流動相相同但不含任何緩沖、酸性或堿性組分的溶劑沖洗色譜柱。讓它沖洗10-20個色譜柱體積的色譜柱。對于反相色譜柱,制造商建議儲存在甲醇或乙腈的某種混合物中,最多含50%的水。但是,正相色譜柱應(yīng)儲存在非極性溶劑中,例如100%乙腈。
同樣重要的是要確保色譜柱被堵塞,并且塞子是緊密的,這樣色譜柱就不會變干。色譜柱也應(yīng)存儲在 15-30℃之間